长春市肉鸡球虫抗药性调查

鸡球虫病( coccidiosis) 是一种分布广、危害严重的疾病，可引起鸡只死亡、增重和产蛋减少、饲料利用率降低等，给养鸡业造成严重的经济损失。虽然近年国内外学者对鸡球虫活疫苗及基因工程疫苗等进行了大量研究工作，但是还未能大面积应用于实际工作中，目前预防鸡球虫病最常用的方法还是在饲料中添加药物。由于球虫易产生抗药性，使药物防治效果降低甚至失效，导致临床或亚临床球虫病的发生。因此，进行鸡场球虫耐药性的调查，制订轮换或穿梭用药方案是预防鸡球虫病发生最为有效的方法。为此，笔者对吉林省长春市的8 个肉鸡场进行了鸡球虫抗药性调查，以期了解抗药性情况，在生产中指导合理用药。

一、材料与方法
（一）试验动物
1 日龄AA 肉鸡140 只，购自吉林德大肉种鸡公司。自配无抗球虫药全价饲料， 80 ℃烘烤1 h，自由采食、饮水，24 h 光照，严格消毒、无球虫环境下饲养， 12， 13 日龄连续2 d 粪检无球虫卵囊鸡用于试验。
（二）卵囊
在长春市8 个肉鸡场采集鸡新鲜粪便，用饱和盐水漂浮法分离纯化卵囊，置26 ℃ 恒温箱中( 孢子化) 。经鉴定，球虫卵囊中含早熟艾美耳球虫13%、堆形艾美耳球虫9%、柔嫩艾美耳球虫30%、和缓艾美耳球虫11%、哈氏艾美耳球虫33%、毒害艾美耳球虫4%。
（三）药物
盐霉素( salinomycin) 、莫能菌素( monensin) 、马杜霉素( maduramicin) ，浙江升华拜克生物股份有限公司产品; 氯羟吡啶( clopidol) 、地克珠利( diclazuril)，齐鲁动物保健品厂产品。
（四）试验设计
试验鸡于14 日龄晨逐只称重，编号。随机分成7 组，即阴性组( 不感染不给药) 、阳性组( 感染不给药) 、盐霉素组、莫能菌素组、地克珠利组、马杜霉素组、氯羟吡啶组，每组20 只。试验采用饲料给药，试验鸡于14 日龄按每1 000kg 全价配合饲料分别添加盐霉素( 50 g) 、莫能菌素( 100 g) 、地克珠利( 1 g) 、马杜霉素( 5 g) 、氯羟吡啶( 125 g) ，至22 日龄结束。除阴性组外其他各组鸡在14 日龄经口接种1． 5 ×105 个孢子化卵囊。收集感染后5 ～ 8 d 的粪便，计数克粪便卵囊数( OPG 值) 。于感染后第9 天逐只称重，剖杀，进行盲肠和小肠病变记分。
（五）抗药性判定指标
用最适抗球虫活性百分率( POAA) 、病变记分减少率( RLS) 、相对卵囊产量( ROP) 和抗球虫指数( ACI) 4 项指标进行综合判定。每项指标有抗药性用阳性( + ) 表示，无抗药性用阴性( － ) 表示。POAA =［( 试验组GSR －阳性组GSR) /( 阴性组GSR －阳性组GSR) ］ × 100%，其中GSR = 末重/始重; POAA≤50%为阳性( + ) ，否则为阴性( － ) 。RLS = ［( 阳性组病变记分－试验组病变记分) /阳性组病变记分］× 100%; RLS≤50% 为阳性，否则为阴性。ROP =( 试验组卵囊数/阳性组卵囊数) × 100%; ROP≥15%为阳性，否则为阴性。ACI = ( 存活率+ 相对增重率) － ( 血便记分+ 病变值+ 卵囊值) ，其中存活率( %) = 存活只数/开始鸡数× 100%，相对增重率( %) = 阳性组或感染用药组增重率/阴性组增重率× 100%，病变值= 每组平均病变记分× 10，卵囊值是当阴性组或感染用药组OPG 值与阳性组OPG 值的比值分别为1% 以下、1% ～ 25%、26% ～ 50%、51%～ 75%和76% ～ 100%时，卵囊值分别为0，5，10，20，40; ACI≤160 为阳性，否则为阴性。
（六）抗药性评定标准
按上述4 项指标中出现阳性指标数量确定抗药程度。无抗药性: 4 项指标均为阴性; 轻度抗药: 4 项指标中有3 项指标为阴性; 中度抗药: 4 项指标中有2 项指标为阳性; 完全抗药: 4 项指标中有3 项及以上指标为阳性。

二、结果与分析
（一）各组鸡增重情况
由实验结果可见莫能菌素组、地克珠利组、盐霉素组的POAA 值分别为106%、87% 和73%，均大于界定值50%，为阴性; 马杜霉素组和氯羟吡啶组的POAA值分别为47%和30%，低于界定值50%，为阳性。
（二）各组鸡病变记分
由实验结果可见: 莫能菌素组、地克珠利组的RLS 值分别为100%、81． 01%，均大于界定值50%，为阴性;马杜霉素组、盐霉素组和氯羟吡啶组的RLS 值分别为46． 60%、42． 57%和18． 92%，低于界定值50%，为阳性。
（三）各组鸡卵囊排出情况
由实验结果可见: 莫能菌素组的ROP 值为2． 05%，小于界定值15%，为阴性; 地克珠利组、马杜霉素组、盐霉素组和氯羟吡啶组的ROP 值分别为15． 71%、23． 97%、31． 09%和63． 27%，均大于界定值10%，为阳性。
（四）各组鸡抗球虫指数
由实验结果可见: 莫能菌素组和地克珠利组的ACI 值分别为197． 95， 181． 41，大于界定值160，为阴性; 盐霉素组、马杜霉素组和氯羟吡啶组的ACI 值分别为147． 08， 142． 35， 102． 97，均小于界定值160，为阳性。
（五）抗药性综合判定
由实验结果可见: 莫能菌素组完全没有抗药性，地克珠利组有轻度抗药性，盐霉素组和马杜霉素组有中度抗药性，氯羟吡啶组有完全抗药性。

三、结果分析
长春市8 个肉鸡场的6 种艾美耳球虫对莫能菌素完全没有抗药性，对地克珠利有轻度抗药性，对盐霉素和马杜霉素有中度抗药性，对氯羟吡啶有完全抗药性。建议长春市肉鸡场不使用氯羟吡啶、盐霉素和马杜霉素3 种抗球虫药物; 地克珠利抗药性较轻，应设计穿梭给药或轮换用药，以延长地克珠利的使用年限; 适量使用莫能菌素。